Nasıl Topraktan bakteri izole edebilir

? Toprak bakterilerin birçok farklı türde zengin bir kaynağıdır . Bakteriler inorganik elementler sabitleme ve bitki kökleri ve toprak parçacıkları ile etkileşim içinde , ayrıştırma bitki ve hayvansal organik konuda yardımcı olur. Hatta küçük bir toprak numunesi için , bu tür bir yemek kaşığı bulunan gibi , bu ayrı ayrı bakterilerin milyonlarca vardır. Bireysel bakteri izole içindegörev tek bir bakteri diğerlerinden ayrılabilir yeterince düşükbakteri konsantrasyonu elde etmek içintoprak örneği seyreltmek için ve besin agarda saf koloni içine büyüyebilir olduğunu. 5 ml test tüpleri , sterilize ve şapkalı
Steril ahşap Buzlu sopa
Test tüpü raf
Kağıt havlular
Bleach Wax işaretleme kalemi
Sen Triptikaz soya broth
ihtiyacınız olacak şeyler ( yüzde 10 çözelti ) Daha Talimatları göster

Petri ocaklar
inkübatör
Buzdolabında
Triptikaz soya ağan
Aşılama döngü Karşılaşmalar
Bunsen brülör
toprak Numune
1 Test tüpleri toprak örnekleri seyreltmek için kullanılır . kenara

Set besin triptikaz soya suyu 5 ml containg bir sarhoş steril test tüpü . Steril bir Popsicle sopa seçin .
2. toprağı toplamak için bir steril Buzlu sopa kullanın.

dışında gidin ve steril tekniği ,örnek kontamine değil sağlamak için bir yöntem vekullanıcı enfekte değil kullanarak ,Buzlu sopanın ucuna küçük bir toprak örneği toplamak .
3

test tüpü kapağını açmak ve test tüpü içindebesin suyu için toprak ekleyin. Popsicle sopa ilesuyu içinetoprak karıştırın . Kapaklıtest tüpü örtün . Kalem işaretlemebalmumu kullanılarak test tüpünün yan tarafındaki toplama tarih ve toplama konumunu yazın .
4

toprak yerleşmek için imkan vermek için yaklaşık 30 dakika boyunca bir test tüpü rafa test tüpü koyun alt .
Inoculate Petri Dish
5

yüzde 10 beyazlatma solüsyonu ve kağıt havlu ile temizlenmesi ileçalışma yüzeyi dezenfekte .
6

petri çevirin . T , kapağın üst üçte birini ayrılması ve üst direğin ve yarısında alt üçte iki bölmeT kök ile , alt kapak üzerinde bir T çizin.
7 kullanımlar bir Bunsen brülör alev döngüler aşılama . açın veBunsen beki ışık

. AlevBunsen beki alev üzerindeaşılama döngü .
8.

kapağını çıkarıntest tüpü ve net sıvınınüst tabakasınadöngü dokunun. Döngü çekiniz vetest tüpü yeniden kapsamaktadır .
T - Streak Yöntem
9yemeğin üçte biri üzerinde zikzak çizgi yapın .

bir referans noktası olarakalt kapağınınarkasındaki çektiTenine kullanın . T direğin üzerinde boşluğun bir tarafındaaşılama döngü dokunun ve alanı ters kenarındaki hattı biten bir zigzag doğrultusunda,agar yüzeyi üzerinde ucu çeker.
10

aşılama döngü çıkarın vepetri kapatın. Bunsen beki olarakdöngü Alev , ve kısaca soğumasını bekleyin . Petri açın ve zatendöngü tarafından çizilenhattınsonuna yakın bir noktayadöngü dokunun. T direğin altında veçubuğun bir tarafınailk alanı kaplayan ,ilk satıra doğru açıda başka bir zikzak çizgi olun .
11döngü çıkarın vepetri kapatın

. , Döngü yeniden alevpetri açın ve sonunaikinci satırabiraz soğutulmuş döngü dokunun. Petri üzerindekalan açık alandaikinci satıra dik açıda başka bir zikzak çizgi çizin .
12döngü çekildikten sonrapetri kapatın

. Döngü alev ve bir kenara koyun . Bunsen beki kapatın . Ayrıca bakterileri izole etmek için tek bir koloni seçin 13

İkincil Kültür .

48 saat boyunca 30 santigrat derece sıcaklıkta bir inkübatördepetri koyun. Bakteri kolonilerinin büyümesi içinağar dışarı almak ve incelemek . Genel görünüm üniforma ve ayrık görünen bir koloni ,koloni sadece tek bir bakterinin ortaya çıktı ki bir gösterge seçin . Çemberişaretleme kalemi ilealt kapağınınarkasındakikolonininyeri .
14.

Alevaşılama döngü . Petri açın ve dokununbirazkolonininmerkezine döngü soğutulur .
15alt kapağında agar ile yeni bir petri plaka üzerinde bir T - çizgi yapmak içinadımları tekrarlayın

. Çizgi yapılır ve petri kapatıldığında,tarih yazmak ve toprakaşılama alt kapağın alt tarafına örnek alınmıştır . Bunsen beki kapatın .
16 48 saat boyunca 30 santigrat derecepetri inkübe

. Renk, şekil ve doku homojenliği arıyor ,agar üzerinde büyüdükoloniler inceleyin . Diğerlerinden görünüşte belirgin sapma herhangi koloniler tek bir bakteri izole olmadığını gösteren , varsaikincil kültür işlemi tekrarlayın .
17. Özdeş görünümlü koloniler bakteri izolasyonu göstermektedir .

buzdolabındatekdüzelik sadece tek bir bakteritoprak örneğinden izole edilmiş bir iyi bir göstergesi olmak , onunla özdeş - görünen koloniler içerenagar plaka .
18 için diğer testleri gerçekleştirin

böyle gram lekeleri gibi istenirseizole bakteri , agar çeşitleri üzerinde mikroskobik muayene ve kültür tanımlama .